据世界卫生组织的报告,6407
例男性不育患者中,有2.9%的患者的病因为免疫因素,在原发性不育中,免疫性不育占2.7%,在继发性不育中,免疫性不育占4.0%
。免疫性不育的主要问题就是抗精子抗体的出现。而抗精子抗体出现后究竟对精液的质量存在哪些实际上的影响呢?
我们选取生殖专科就诊的精子表面抗体阳性(MAR
法)的男性患者41例,年龄24-40岁,平均32.0岁。另选健康体检精子表面抗体阴性(MAR法)的男性20名,年龄23-38岁,平均30.5岁,作为对照组。
采用常规方法留取全部精液于干燥消毒无毒性的杯内,置37
℃水浴箱内液化后
进行检测。严格按照世界卫生组织《人类精液及精子一宫颈粘液相互作用实验室检验手册》(1999
年第四版)[1]
的方法对精液量、pH
值、存活率进行测定;精子密度以及活力则使用西班牙的SCA精液分析仪进行测定;精子形态使用巴士染色法,以WHO的分类方法进行分类。
取液化后的新鲜精液20μ
l于载玻片上加敏化绵羊红细胞20μ
l混匀后置室温15s
;加羊抗人IgG
血清20μ
l,混匀后加盖玻片;3 min
后置于光学显微镜下镜检计数:10min
后重复计数1
次。
精
子表面无AsAb
,可见精子在粘附的sRBC间自由泳动。精子表面有AsAb存在,则敏化sRBc粘附于精子并一起扭动,在强阳性情况下,凝块形成极为巨大,
精子只在标记sRBc
形成的凝块中扭动。至少计数100个活动精子,计算粘附有sRBc的活动精子在总活动精子所占的百分比。阳性率R=(粘附sRBc的活动精子/计数总活动精子数)×100%。①R≤10,判为阴性;②R>10判为阳性;③R≥40,判为强阳性,重点考虑为AsAb引起的免疫性的不育[2]
。
结果依据精子表面抗体的阳性率分为三组,即MAR
阴性(组1)20例、MAR阳性(组2)27例、MAR强阳性(组3)14例。抗精子抗体阳性患者在精子存活率、精子活力(a+b)%和正常形态等方面与抗精子抗体阴性的正常体检者比较差异有统计学意义(P<0.05);精液量和精子密度与正常体检者比较差异无统计学意义(P>0.05)。
男性精浆中含有几十种抗原,精子具有抗原性,而且精子是在青春期之后才出现的,因此被视为非己。男性生殖系统具有多种抗原性,理应容易引起机体的免疫反应,从而干扰正常的生殖生理过程。然而,在正常情况下,由于机体具有防止发生该反应的机制——
血睾屏障的存在和精浆免疫抑制活性物质的作用,以及生殖道免疫活性细胞的作用,使这些抗原免疫反应并不发生[4]
。
许多因素如长期大量吸烟、激素、细胞因子、抗体、超抗原、粘附分子、免疫细胞、药物、毒物、高温、放射线等对精子凋亡和精子质量有明显影响[5]
,而其中的某些病理因素,如
生殖道炎症、损伤、梗阻等使这些机制遭到破坏,机体就会发生自身免疫反应,精子作为一种免疫禁忌细胞可以导致自身及同种异体抗体形成,引起不孕不育及流产[6].
杨介礼等报道的亚临床型精索静脉曲张不育患者手术三个月后抗精子抗体阳性率的由术前的90.0%
降为28.0%[7]
,亦从另一方面证明了这一点。抗精子抗体是1954
年Wilson和Rumke
首先在男性不育症患者血清中发现的。随着生殖免疫学的发展,研究者发现男性免疫不育血清和精液中均存在多种AsAb
。2000年WHO诊断标准为:性及射精功能正常,在至少一份精液标本中,混合抗球蛋白反应试验或免疫珠试验(IBT)有不少于50%活动精子表面被覆抗体。原因不明的不育夫妇中,约10%为免疫因素所致。在不育男子中有6%-10
%可在血或精液中查到抗精子抗体。据WHO报道,体内存在抗精子抗体而致不育患者占总不育的20%-30
%。
但是在我国国内应用MAR
法进行抗精子抗体的检测并未得到广泛的重视及开展,因此了解抗精子抗体产生后对精液的质量究竟存在哪些实际影响对于临床应用来说具有相当的意义。
根据我们的研究显示在精子存活率方面:组1
、组2、组3均值逐渐降低,三组之间比较有显著性差异;在前向运动精子比率(a+b)%方面:组1、组2、组3均值逐渐降低,三组之间比较有显著性差异;在精子正常形态比率方面:组1
与组2
、组3之间比较有显著性差异,但组2、组3之间比较无显著性差异。由此可见:抗精子抗体增高,将直接影响精子的存活率,损害精子的运动,并对精子的形态造成一定的影响,从而使精子的受精能力明显下降。
从测定的结果表明抗精子抗体的浓度与精子功能及受精能力受损的严重程度直接相关,从而证明对所有男性不育患者普遍性地进行常规应用MAR法筛查精液中的抗精子抗体是非常重要的,应该普及该试验以利于及早诊断和治疗男性免疫性不育。
参考文献
[1] 世界卫生组织.人类精液及精子一宫颈粘液相互作用实验室检验手册[M].4版.1999.
[2] 马乐,潘柏年,陈宝英.男性不育与辅助生殖技术[M].1版.北京:人民卫生出版社,2002:94—99.
[3]潘天明,朱积川,李江源.男科实验室诊断技术[M].1版.北京:人民军医出版社,2006:7.
[4]辛才林,朱元,唐亮,等.男性不育患者常规进行MAR法筛查的研究[J].安徽医学,2009,13(9):1084.
[5] 王光荣,周曾娣,葛争鸣.吸烟对精子凋亡的影响[J].现代医院,2005,5(5):25—26.
[6] 刘红杏,庞伟鸿,谢虹桥.精子异常患者垂体催乳素测定的临床价值[J].现代医院,2007,7(7):32.
[7]杨介礼,陈庆存,黄定蒙.亚临床型精索静脉曲张不育患者手术前后精液质量、性激素和抗精子抗体的变化:J].实用医学杂志,2009,25(15):2473—2474.
[8]文章转载现代医院2010年2月第10卷第2期专业技术
[9]文章仅供学习与参考